EXPERTO EN ENSAYOS MICROBIOLÓGICOS

– Conocer las características de los principales grupos de microorganismos, así como su evolución y relaciones filogenéticas.
– Identificar los principales grupos de microorganismos de interés en microbiología, conociendo sus rasgos estructurales y las afecciones que provocan en la salud del ser humano y de los animales.
– Aprender cómo se realizan las técnicas del laboratorio de ensayos microbiológicos: limpieza y esterilización, muestreo y preparación de la muestra, preparación de medios de cultivo e incubación y conservación de cultivos.
– Saber el fundamento y la aplicación de las diferentes pruebas que se emplean en el laboratorio para identificar adecuadamente los microorganismos.
– Conocer los fundamentos del control microbiológico del agua, de los alimentos, del aire, de las superficies y del suelo.

UNIDAD DIDÁCTICA 1. INTRODUCCIÓN A LA MICROBIOLOGÍA
Introducción a la Microbiología
Definiciones y autores principales
Laboratorios Microbiológicos
Conceptos relacionados
Principios de taxonomía bacteriana y evolución
– La importancia del conocimiento de la evolución en Microbiología
– Condiciones físico-químicas de la Tierra primitiva
– Los organismos primitivos
– El origen de la célula eucariota
– Relaciones filogenéticas entre los microorganismos

UNIDAD DIÁCTICA 2. EL LABORATORIO MICROBIOLÓGICO
El laboratorio como lugar de trabajo
Identificación de materiales y equipos usuales
– Clasificación de los materiales
Clasificación de los agentes biológicos
Buenas prácticas de laboratorio
Laboratorio básico
Técnicas de laboratorio
Niveles de seguridad
Normas de seguridad en microbiología
Vías de infección
Higiene en el trabajo del laboratorio microbiológico
Limpieza y eliminación del material
Residuos infecciosos
Tratamiento de residuos infecciosos
Teoría microbiana de la enfermedad
Microorganismos patógenos

UNIDAD DIDÁCTICA 3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS BÁSICOS DEL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA
Materiales de laboratorio
– Materiales de vidrio
– Materiales de plástico
– Materiales de porcelana
Instrumentos y aparatos del laboratorio
– Balanzas
– Centrífugas
– Instrumental de corte
– Instrumental de disección
– Instrumental de hemostasia
– Instrumental de talla o campo
– Instrumental de sutura
– Utensilios básicos de laboratorio
Material volumétrico
– Probeta
– Pipeta
– Bureta
– Matraz aforado
Equipos automáticos
– Automatización en el procesamiento de las muestra
– Equipamiento básico del laboratorio de hematología
Reactivos químicos y biológicos
– Equipos de reactivos

UNIDAD DIDÁCTICA 4. MICROSCOPÍA
Microscopio
Tipos de microscopios
Funcionamiento del microscopio
Características que definen a un microscopio
Aberraciones
Microscopio óptico
Normas generales de uso
Manejo de objetivos
Normas de uso utilizando el objetivo de inmersión
Mantenimiento y precauciones de uso
Microscopios electrónicos
Otros tipos de microscopios

UNIDAD DIDÁCTICA 5. MICROORGANISMOS RELACIONADOS CON LOS PROCESOS INFECCIOSOS
Características principales de los microorganismos
Tipos de microorganismos
– Cocos gram positivos y negativos
– Bacilos gram positivos
– Bacilos gram negativos
– Bacilos gram negativos exigentes
– Bacterias anaerobias
– Micobacterias
– Hongos
– Virus
– Parásitos

UNIDAD DIDÁCTICA 6. PREPARACIONES MICROSCÓPICAS
Confección de preparaciones
Preparaciones vitales
Preparación de gota pendiente
Tinción negativa
Coloraciones vitales
Tinción simple
Tinción de Gram
Tinción de Ziehl-Neelsen
Tinción de flagelos
Tinción de cápsulas
Tinción de esporas
Otras tinciones

UNIDAD DIDÁCTICA 7. LIMPIEZA Y ESTERILIZACIÓN
Términos de uso más frecuente
Limpieza del material de vidrio
– Material nuevo
– Material usado
Algunos agentes microbicidas y microbiostáticos
Factores que afectan a la esterilización y a la desinfección
Termodestrucción
Esterilización por medio de calor seco
Esterilización por medio de calor húmedo
– Técnicas de esterilización por calor húmedo
Esterilización por filtración
Esterilización por radiaciones
Desinfectantes químicos
Pruebas de esterilidad de los equipos de laboratorio
– Controles físicos
– Controles químicos
– Controles biológicos
Evaluación de desinfectantes
– Coeficiente fenólico
– Recuento en placa
– Filtración por membrana
– Técnica de dilución en tubo
– Susceptibilidad microbiana
Antimicrobianos
Antibióticos
Resistencia microbiana
– Mecanismos de resistencia de las bacterias
Patógenos resistentes
Vacunas

UNIDAD DIDÁCTICA 8. MUESTREO Y PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
Muestreo
Requisitos de las muestras
Muestras líquidas
Muestras sólidas
Muestras gaseosas
Muestras superficiales
– Método del hisopo
– Método de la esponja
– Método de enjuague total (microbiológico)
Muestreos anaerobios
Programas de los planes de toma de muestras
Muestreo de alimentos
– Definiciones
– Plan de dos clases
– Plan de tres clases
– Uso de normas MIL STD 105 E
Elección de muestras no tomadas al azar
Transporte y almacenamiento
– Almacenamiento de muestras
Medidas de masa y volumen
– Técnicas básicas de medida de masa
– Técnicas básicas de medidas de volumen
Preparación de disoluciones y diluciones. Formas de expresar la concentración
– Disoluciones o soluciones
– Diluciones

UNIDAD DIDÁCTICA 9. MUESTRAS BIOLÓGICAS HUMANAS: MANIPULACIÓN Y PROCESAMIENTO
Tipos de muestras
Muestras analizables
Análisis cualitativo y cuantitativo
Determinación analítica
– Fases de la determinación analítica
– Solicitud de determinaciones analíticas
Perfil analítico. Batería de pruebas
Errores más comunes en la manipulación
– Errores de identificación
– Tipo de muestra
– Interferencias del espécimen
– Procesamiento del espécimen
– Errores derivados del almacenamiento del espécimen antes de la determinación
– Normas de seguridad en el manejo de las muestras
Prevención en la manipulación de la muestra
Características generales del procesamiento de muestras en función de las mismas
– Procesamiento de muestras para estudios bioquímicos
– Procesamiento de muestras microbiológicas
– Tratamiento general de la muestra pre-inoculación para cultivo de bacterias
– Procesamiento según el tipo de muestra
Requisitos mínimos para el procesamiento de la muestra

UNIDAD DIDÁCTICA 10. MEDIOS DE CULTIVO
Necesidades nutritivas de los microorganismos
Requerimientos energéticos
Requerimientos no energéticos
Constituyentes habituales de los medios de cultivo
Clasificación según su origen
Clasificación según su estado físico
Clasificación según su utilidad
Clasificación según su composición
La evolución de los medios de cultivo
Medios deshidratados
Preparación de los medios de cultivo
Determinación y ajuste del pH
Control de medios preparados
Formulación de algunos medios de cultivo usuales
– Medios no selectivos
– Medios selectivos
UNIDAD DIDÁCTICA 11. TIPOS DE CULTIVOS Y TÉCNICAS DE SIEMBRA
Cultivo de bacterias
Tipos de cultivos y sus siembras
– Siembra por estrías
– Siembra por punción
– Siembra volumétrica
– Siembra masiva
Manejo de las muestras y toma del inóculo
Cultivos en placa
Cultivos mediante disoluciones seriadas
Método de cultivo anaerobio
Vasijas anaerobias
Cultivo en atmósfera de C02
Características morfológicas y de cultivo de una bacteria
– Morfología bacteriana
– Características de cultivo

UNIDAD DIDÁCTICA 12. INCUBACIÓN Y CONSERVACIÓN DE CULTIVOS
Incubación
Efecto temperatura
Efecto tiempo
Conservación de cultivos
Mantenimiento de periodos cortos
– Refrigeración simple
– Cultivo en agar inclinado
– Cultivos en medio líquido
Mantenimiento en periodos largos
– Conservación en aceite
– Suspensiones en suero desecado
– Congelación
– Liofilización
Velocidad de crecimiento
Cinética de crecimiento bacteriano
– Tasa de generación
– Determinación de la tasa de generación

UNIDAD DIDÁCTICA 13. IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS
Análisis microbiológicos
Fases para la identificación de microorganismos
Estudio de los caracteres culturales, morfológicos y fisiológicos
– Caracteres culturales
– Caracteres morfológicos
– Caracteres fisiológicos
Pruebas bioquímicas para el análisis de bacterias
Pruebas relacionadas con proteínas, aminoácidos y otros compuestos nitrogenados; así como pruebas de actividad proteolítica
– Hidrólisis de la gelatina
– Hidrólisis de la caseína
– Hidrólisis del suero coagulado
– Producción de indol a partir de triptófano
– Producción de amoniaco a partir de la peptona o de la arginina
– Producción de ácido sulfhídrico
– Producción de amoniaco a partir de urea
– Reducción del nitrato
Pruebas relacionadas con los carbohidratos y otros compuestos carbonados
– Hidrólisis de almidón
– Producción de ácidos a partir de azúcares, glucósidos y alcoholes polihidroxílicos
– Diferenciación entre la oxidación y fermentación de carbohidratos
– Producción de dióxido de carbono a partir de glucosa
– Prueba del rojo de metilo
– Prueba de Voges-Proskauer
– Utilización del citrato como única fuente de carbono
– Producción de polisacárido a partir de sacarosa
– Acción de la leche tornasolada
Pruebas relacionadas con los lípidos
– Hidrólisis de la tributirina
– Lipólisis
– Hidrólisis de los compuestos del Tween
– Hidrólisis de la lecitina
Otras pruebas bioquímicas
– Prueba de la catalasa
– Prueba de la oxidasa
– Prueba de la coagulasa
– Prueba de la fosfatasa
– Hemólisis de sangre
– Prueba de la potasa
– Prueba de la motilidad
Métodos serológicos
– Aglutinación
– Fijación del complemento
– Técnicas de precipitación en gel
– ELISA
– Seroinhibición
Técnicas genéticas
– Métodos moleculares basados en ácidos nucleicos
– Métodos moleculares no basados en ácidos nucleicos
Galerías comerciales
– API
– BBL
Antibiograma
– ¿Cuándo se realiza un antibiograma?
Pruebas directas
– Frotis en fresco
– Tinciones
– Cultivo
– Búsqueda del antígeno
– Detección productos metabólicos
– Detección ácidos nucleicos

UNIDAD DIDÁCTICA 14. RECUENTO DE MICROORGANISMOS
Técnicas de recuento
Determinación del número de bacterias viables en una muestra
– Método de recuento de colonias
– Filtración a través de membrana
– Recuento por dilución en tubos o técnica del Número Más Probable
– Métodos de reducción del colorante
Determinación del número total de bacterias de una muestra
– Método de extensión de Breed
– Recuento por observación directa al microscopio
– Métodos turbidimétricos
– Cámara de recuento
Métodos físicos para la detección de microorganismos
Métodos químicos de detección de microorganismos
Métodos inmunológicos de detección de microorganismos

UNIDAD DIDÁCTICA 15. MICROORGANISMOS INDICADORES Y PATÓGENOS
Microorganismos indicadores
Características que deben reunir los indicadores fecales
Microorganismos indicadores, patógenos y toxicogénicos de estudio frecuente
Recuento de microorganismos aerobios mesófilos
– Recuentos
Recuento de coliformes
– Recuento en medio sólido
– Recuento en medio líquido
Recuento de Enterobacteriaceae totales
– Recuento en medio sólido
– Recuento en medio líquido
Recuento de estreptotococos fecales
– Recuento de Streptococcus D de Lancefield en medio sólido
– Recuento de Streptococcus D de Lancefield en medio líquido
Recuento de Escherichia coli
– Procedimiento de recuento
Recuento de Salmonella
Recuento de Shigella
Recuento de Clostridium sulfitorreductores
– Recuento de formas vegetativas y esporuladas de Clostridium sulfitorreductores, en conjunto
– Recuento de formas esporuladas de Clostridium sultitorreductores
Recuento de Staphylococcus aureus
– Método de enriquecimiento en tubos
– Pruebas confirmativas
Recuento de Bacillus cereus
– Recuento en placa
– Técnica del Número Más Probable (NMP)
Recuento de Clostridium botulinum

UNIDAD DIDÁCTICA 16.CONTROL DE SUPERFICIES, DEL AIRE Y DEL SUELO
Control microbiológico ambiental
Control de superficies
– Tipos de muestras
– Método del hisopo
– Método de la esponja
– Método de enjuague total (microbiológico)
Sistemas comerciales
– Placas Contact Plate
– Placas Count-Tact
– Probetas Easicuit
– Placas Petrifilm
– Swab Test kit
– Hy food test
– Desinfectest
Microorganismos estudiados
Control de los manipuladores de alimentos
Control del aire. Método de sedimentación en placas de agar
Otros métodos de control del aire
– Radiaciones ultravioleta
– Agentes químicos
– Filtración
– Flujo laminar
Evaluación del grado de contaminación del aire
El aire acondicionado
– Patologías y microorganismos vinculados a los sistemas de ventilación
El suelo como medio
– La rizosfera
– Los microorganismos en la actividad biogeoquímica
– Biodegradación
– Biorremediación
– Biotoxicidad
Examen microbiológico del suelo

UNIDAD DIDÁCTICA 17. CONTROL DEL AGUA
Calidad sanitaria del agua
– Características de las aguas residuales
– Propiedades físicas
– Propiedades químicas
– Materia inorgánica
Agua potable
Desinfección del agua potable
– Métodos de desinfección
– Desinfección por cloro y derivados
Factores que afectan a la cantidad y a las clases de microorganismos presentes en las aguas naturales
Microorganismos presentes en aguas naturales
– Bacterias indicadoras de contaminación de las aguas
Toma de muestras acuosas para el análisis de agua residual
– Procedimiento de muestreo de aguas
Toma de muestras para el análisis de agua potable
– Métodos y muestras
– Calidad del muestreo
Control de la calidad sanitaria del agua
Legislación
Aguas de consumo
– Aguas de consumo humano
– Aguas naturales envasadas
– Aguas preparadas envasadas
Aguas de baño
– Agua continental
– Aguas costeras y de transición
– Piscinas de uso colectivo

UNIDAD DIDÁCTICA 18. CONTROL DE LOS ALIMENTOS
Generalidades
Los alimentos como medio de cultivo
Conservación de los alimentos
– Técnicas de conservación basadas en la temperatura
– Conservación con aditivos
Microorganismos implicados
Enfermedades alimentarias
– Clasificación de las ETA
Muestreo y preparación de la muestra de los alimentos
– Preparación de la muestra
Análisis bacteriológicos de los alimentos
Legislación actualizada
– Legislación mundial
– Legislación europea
– Legislación española
Definiciones
Criterios microbiológicos para los productos de consumo
Los Programas Europeos DOP, IGP, ETG

UNIDAD DIDÁCTICA 19.CONTROL DE CALIDAD EN ANÁLISIS MICROBIOLÓGICOS
Criterios de calidad
– Introducción
– Control de la Calidad
– Manuales y Sistemas de Calidad en el Laboratorio (ISO 9000, ISO 17025, BPL, etc.)
Trazabilidad, aseguramiento de calidad y cálculos asociados
– Tratamiento general de la muestra pre-inoculación para cultivo de bacterias
– Cálculos asociados y aseguramiento de la calidad
Registro de resultados y emisión de informes
– Informes de laboratorio

UNIDAD DIDÁCTICA 20. ACTIVIDADES PRÁCTICAS
Actividad Práctica 1: Toma de muestras
Actividad Práctica 2: Microscopía
Actividad Práctica 3: Caso clínico
Actividad Práctica 4: Esterilización y desinfección
Actividad Práctica 5: Recuento de colonias bacterianas