Objetivos
Contenidos
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- MÓDULO 1. Técnicas de Reproducción en Animales Utilizados en Procedimientos Experimentales
UNIDAD FORMATIVA 1. REPRODUCCIÓN Y CRÍA DE ANIMALES DE EXPERIMENTACIÓN
UNIDAD DIDÁCTICA 1. REPRODUCCIÓN ANIMAL
- Anatomía del aparato reproductor masculino:
- – Esquema del aparato reproductor masculino en mamíferos
- – Órganos, conductos y vías, vesículas y glándulas
- Fisiología reproductiva masculina:
- – Desarrollo y funcionamiento del aparato reproductor
- – Espermatogénesis, almacenamiento y maduración de los espermatozoides
- Anatomía del aparato reproductor femenino:
- – Esquema del aparato reproductor femenino en mamíferos
- – Órganos y conductos
- – Características anatómicas en las distintas especies de animales de experimentación
- Fisiología reproductiva femenina:
- – Desarrollo y funcionamiento del aparato reproductor
- – Oogénesis y ovulación
- – Diferencias en la ovulación según la especie: espontánea o inducida
- Características reproductoras de los principales animales de laboratorio
- – Vida fértil y edad óptima de cruce
- – Periodo de gestación
- – Celo postparto
- – Pseudogestación
- – Efecto Witten (sincronización del celo)
- – Efecto Bruce
- Fisiología del celo, cubrición y gestación:
- – Ciclo estral. Fases del ciclo
- – Hembras poliestricas (anuales y estacionales), biestricas y monoestricas
- – Cambios fisiológicos y comportamiento de las hembras durante el celo
- – Influencia en la conducta sexual de los factores: Sociales, ambientales y fisiológicos
- – Duración del celo y aspectos relacionados con la cubrición según especie animal
- – Comprobación de la cópula: frotis vaginal o visualización del tapón vaginal
- – Dónde y cómo se produce la fecundación. Formación del zigoto
- – Fases de la gestación: huevo, embrión y feto
UNIDAD DIDÁCTICA 2. GESTIÓN DE COLONIAS DE ANIMALES DE EXPERIMENTACIÓN
- Poblaciones naturales y de laboratorio.
- – Definición de poblaciones naturales y artificiales
- – Elementos de genética de poblaciones. Selección de los progenitores
- – Frecuencias génicas y genotípicas. Ley de Hardy-Weinberg
- Cría de animales de experimentación.
- – Sistemas de cruce: monogámico, poligámico y harén
- – Ventajas e inconvenientes de los distintos sistemas de cruce
- Protocolos de cruzamiento:
- – Obtención de animales consanguíneos o Inbred: Programa de líneas paralelas o programa de línea simple
- – Obtención de animales no consanguíneos u Outbred: Sistema Robertson y Sistema Rotativo o de Poiley
- – Sistema al azar
- – Programas de cría de registro y control informatizados de las colonias de animales
- Destete de animales de las especies utilizadas con mayor frecuencia en investigación.
- – Tamaño de la camada
- – Sexado
- – Edad y peso al destete
- – Realización de los lotes
- – Etiquetado
- Cría de animales transgénicos.
- – Elección de los progenitores, gestión informatizada, genotipado y crioconservación
- Organismos modificados genéticamente (OMG).
- – Legislación y normativa actualizada sobre la utilización de OMG
- – Precauciones y medidas de contención de animales modificados genéticamente según la especie
UNIDAD DIDÁCTICA 3. GENÉTICA DE LOS ANIMALES DE LABORATORIO
- Estandarización genética.
- – Calidad del animal de experimentación: Interacción genotipo-ambiente
- – Causas que justifican el control de la pureza genética: Mutaciones espontáneas e interacción accidental con otra cepa
- – Prevención del control de la pureza genética: congelación de embriones y aislamiento físico
- Factores que afectan la composición genética de las poblaciones de laboratorio:
- – Selección genética de los animales.
- – Consanguinidad: concepto, aplicaciones, consecuencias en los animales.
- – Deriva y variabilidad genética: Definición y consecuencias en la colonia.
- Animales homocigóticos y heterocigóticos:
- – Manifestación de un Knock-out en homocigosis
- – Mantenimiento de líneas transgénicas en heterocigosis y genotipado para detección de homocigóticos
- Categorías de animales de laboratorio en función de su constitución genética.
- – Características de las líneas consanguíneas
- – Líneas genéticamente estandarizadas: Líneas consanguíneas, Híbridos F1, coisogénicas, congénitas, consanguíneas recombinantes (RIS), congénitas recombinantes (RCS), consómicas y conplásticas. Líneas no consanguíneas
- – Influencia de la genética sobre los resultados experimentales
- – Aplicaciones específicas en investigación de las distintas categorías genéticas
- Nomenclatura e identificación de animales. Reglas de nomenclatura internacional
- – Nomenclatura de las líneas consanguíneas.
- – Nomenclatura de las líneas coisogéncas y congénitas
- – Nomenclatura de las líneas consanguíneas recombinantes
- – Nomenclatura de las líneas cogénicas recombinantes
- – Nomenclatura de los ratones knock-out
- – Nomenclatura de los roedores no consanguíneos
- Transgénesis y mutagénesis dirigida:
- – Técnicas de obtención de animales transgénicos: Método de microinyección y Método del retrovirus
- – Técnicas para generar mutaciones heredables en ratón
- – Creación de ratones Knock-out
- Genotipado y fenotipado.
- – Detección de la alteración genética mediante reacción en cadena de polimerasa (PCR)
- – Equipos para PCR: termocicladorres
- – Identificación del individuo
- – Bases de datos fenotípicas internacionales
- – Métodos de control de la pureza genética de los animales de experimentación:
- – Marcadores bioquímicos
- – Marcadores Inmunológicos
- – Análisis del color del pelaje
- – Injertos de piel
- – Caracteres reproductivos
- – Marcadores de ADN. Fingerprinting de ADN. Análisis de microsatélites por PCR. Otras técnicas moleculares
- Bases de datos y bancos de animales transgénicos. Gestión a través de programas informáticos
- – Registro de información individualizada de: Construcción, línea, generación, genotipo, sexo, color, edad, identificación, caracterización fenotípica, progenitores (genealogías), investigación de destino y responsable
UNIDAD FORMATIVA 2. REPRODUCCIÓN ASISTIDA EN ANIMALES DE EXPERIMENTACIÓN
UNIDAD DIDÁCTICA 1. TÉCNICAS NO NATURALES DE REPRODUCCIÓN
- Obtención de gametos y embriones:
- – Lavado del epidídimo y los vasos deferentes y esperma eyaculado (lavaje de los cuernos uterinos)
- – Lavado de oviducto y útero
- – Conservación de espermatozoides, ovocitos y embriones
- Técnicas de reproducción asistida:
- – Ventajas e inconvenientes de la inseminación artificial y la fertilización in vitro
- Técnicas de la Inseminación artificial:
- – Inseminación por vía vaginal
- – Inseminación por vía uterina
- – Transferencia del esperma dentro del oviducto por procedimiento quirúrgico
- Etapas de la Inseminación artificial:
- – Elección de las hembras con elevado índice de fertilidad
- – Protocolo de superovulación
- – Sincronización del celo – Inseminación al comienzo del estro
- – Cruce de hembras con machos vasectomizados – pseudogestación
- Etapas y técnica de la fecundación in Vitro (FIV):
- – Medios de cultivo de los gametos, incubación y fecundación
- – Factores que influyen en la probabilidad de fecundación
- – Selección y sistemas de control de embriones
- – Transferencia de embriones: Implantación quirúrgica de los óvulos fecundados
- Rederivación de embriones:
- – Objetivo: Mejorar la calidad sanitaria de los animales
- – Protocolo de rederivación: Superovulación, fertilización natural y transplante de los embriones a una hembra pseudopreñada
UNIDAD DIDÁCTICA 2. CONSERVACIÓN Y CRIOPRESERVACIÓN DE GAMETOS Y EMBRIONES
- Fundamentos de criobiología.
- – Principios físicos: temperatura y cambios de estado
- – Principios químicos: composición de los crioprotectores
- – Principios biológicos: diferencias entre células, tejidos o especies
- Equipos y medios de crioconservación.
- – Equipos de congelación: baños de alcohol, tanques de nitrógeno, congeladores programables, pajuelas, etc.
- – Dos enfoques para la criopreservación: la congelación controlada (lenta y rápida) y la vitrificación (congelación ultra-rápida)
- – Medios (crioprotectores): elección y concentración del medio en función de la técnica
- Objetivos y ventajas de la criopreservación de gametos y embriones:
- – Prevención de la contaminación genética
- – Limitación de la deriva genética por la variación en la frecuencia de los genes
- – Mantenimiento de líneas transgénicas y mutantes a largo plazo
- – Reducción de costes
- – Control de las patologías asociadas al mantenimiento animales vivos
- Ventajas e inconvenientes de la crioconservación de espermatozoides o embriones:
- – Tiempo
- – Coste
- – Recursos materiales
- Crioconservación de gametos y embriones.
- – Congelación de esperma: crioprotectores, temperaturas y tiempos específicos
- – Estrategias de congelación de oocitos: en estado inmaduro (en forma de vesícula germinal) y en estado maduro (después de la ovulación) bajo la forma de oocitos en metafase II, con mayor eficacia.
- – Embriones: estadío-eficacia del sistema
- – Sistemas de identificación, registro y mantenimiento de gametos y embriones criopreservados, bancos de embriones y gametos congelados
- – Medidas preventivas y de protección durante el manejo de productos para la criopreservación.
- – Control de calidad.